孟剑霞 1  杨盟 *2 

1.上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科 上海黄浦 200011

2. 上海交通大学医学院附属第九人民医院药剂科 上海黄浦 200011 

摘 要：目的 : 制备复方罗哌卡因乳膏，并对其进行含量测定、体外透皮及药效学研究。方法：十八醇、聚乙二醇 -7- 硬脂酸酯、 轻质液状石蜡为乳膏油相，利多卡因和罗哌卡因为主药制备复方罗哌卡因乳膏；采用 HPLC 法于 220nm 波长处测定复方罗 哌卡因乳膏中利多卡因和罗哌卡因的含量；采用 Franz 扩散池对乳膏进行体外透皮试验；采用小鼠热板试验进行药效学研究。 结果：复方罗哌卡因乳膏能显著提高热板法实验小鼠的痛阈，并均呈良好的量效依赖关系。结论：复方罗哌卡因乳膏具有 良好的局部麻醉效果，且不良反应少，可广泛用于临床。 

关键词：复方罗哌卡因；乳膏；HPLC；体外透皮；药效学研究

 前言

 罗哌卡因作为长效酰胺类局部麻醉剂，麻醉效能强、作 用持久，能够使感觉与运动阻滞分离，对中枢神经及心血管 系统毒性低。利多卡因也属于酰胺类局麻药，起效快、弥散 性强、不良反应少，广泛应用于整形美容门诊手术 [1]。复方 利多卡因乳膏通过释放利多卡因与罗哌卡因两种活性成分， 使其渗透至皮肤及皮下层（深度可达 5–6 毫米），并在痛 觉感受器和神经末梢处富集，从而发挥局部麻醉效果。本研 究制备了外用复方罗哌卡因乳膏剂，不仅给药方便，而且还 避免了全身的不良反应，提高了长期用药的安全性。 

1 实验方法和结果 

1.1 处方组成 利多卡因 5%、罗哌卡因 3%，聚乙二醇 -7- 硬脂酸酯 12.5 %，十八醇 4 %，轻质液状石蜡 13 %，羟苯乙酯 0.1 %， EDTA-2Na 0.1%, 其余加纯化水适量

 1.2 制备工艺

 取聚乙二醇 -7- 硬脂酸酯、十八醇、轻质液状石蜡、 羟苯乙酯于 500 ml 不锈钢杯中，为油相；将利多卡因、罗 哌卡因、EDTA-2Na、适量水于 500 ml 烧杯中，为水相；将 水相油相分别置于煤气炉上加热至融化；利用温度检测器， 当待测温度达到 70℃时，将油相缓慢注入水相中，并在持 续搅拌状态下冷却至室温，随后密封保存，最终制得白色细 腻的乳膏。

 1.3 含量测定方法的建立

 1.3.1 色谱条件

 C18 色谱柱，流动相：0.025mol/L 磷酸缓冲液（PH 2.5）： 乙腈 =80：20，流速：1.0 mL/min，检测波长：220 nm，柱温： 25℃，进样量：20 μL，进样浓度：0.2mg/mL 

图 1 高效液相色谱图（A 利多卡因；B 罗哌卡因；C 复方罗哌卡因 乳膏）

 1.3.2 线性关系实验

 精密配制利多卡因对照品溶液 0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、 8.0、10.0、20.0、50.0，100.0 mg/ ml，将各标准溶液分别转 移至 10 ml 容量瓶中，混匀吸取 20 μl 进样。以利多卡因对 照品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得到线 性回归方程 y = 28632x － 6104.5（R2 = 0.9962）。结果表明，在 0.50~100.00 μg/ml 浓度范围内，利多卡因吸收峰面积与 浓度之间具有良好的线性关系；以同样方法得罗哌卡因线性 回归方程为 y=30107x － 4290.3（=0.9996）。结果表明，罗 哌卡因吸收峰面积 A 与浓度 C 在 0.50~100.00 μg/ml 范围内 呈良好线性关系。

 1.3.3 方法学验证与含量测定

 取对照品溶液，按色谱条件进样，重复进样 6 次，利 多卡因 RSD 值为 0.42%。罗哌卡因峰 RSD 值为 0.24%，表 明仪器测试的精密度良好。平行配置 6 份供试品溶液，测得 利多卡因与罗哌卡因的峰面积相对标准偏差（RSD）分别为 1.40% 和 1.31%，表明该方法具有优良的重复性。精密称取 6 份已知含量的乳膏样品，每 3 份为一组，分别精密添加适 量利多卡因与罗哌卡因对照品溶液至复方罗哌卡因乳膏中， 经进样并记录峰面积后计算回收率。结果显示，利多卡因的 平均加样回收率为 95.11%，RSD 为 2.07%；罗哌卡因的平 均加样回收率为 94.90%，RSD 为 2.42%，表明该方法具有 良好的回收率。取 3 批复方利多卡因乳膏，按色谱条件进样， 计算含量，三批样品中利多卡因含量分别为 4.89%、4.93%、 4.90%，罗哌卡因含量分别为 3.46%、3.37%、3.41%。

 1.4 处方筛选设计实验 

本实验采用体外透皮实验筛选复方罗哌卡因乳膏处方。

 1.4.1 离体皮肤的制备 

实验前一天将（20±2 g）KM 小鼠腹部用脱毛膏进行脱 毛，第二天处死小鼠后，立即取完整的腹部脱毛皮肤样本， 并用刀片清除皮肤表面残留的脂肪及其他附着组织，用 0.9% 氯化钠溶液洗净后，锡箔纸密封，置于 4 ℃冰箱短期保存备用。

 1.4.2 体外透皮实验 

取出前一天处理好的离体皮肤，浸泡于 0.9% 生理盐水 中半小时，吸干小鼠皮肤表面水分，将皮肤角质层朝上固定 于 Franz 扩散池中。在接收池内放置磁子，并注入 PBS 溶液 作为接收液，置于 32℃ 恒温水浴中。将 0.2 ml 实验乳膏均 匀涂抹于皮肤表面，铝箔密封。分别于 0.5、1、2、3、4、 6、8、10 和 12 小时时间点从接收池中取样 1 ml 接收液，并 向接收池中补充 1 ml PBS。样品超声半小时破乳，离心（5 min，10000 rpm）, 取上清液，按照色谱条件对其进行测定。

 按下列公式计算单位面积药物的累积渗透量（Q）：Q= [Cn*V+Σ（Cᵢ×1）] /S。其中，Q 表示药物在单位面积内的 经皮累积渗透量，S 为有效透皮面积，V 代表接收液体积， Cᵢ 是从首次取样到上一次取样时各接收液中的药物浓度， Cn 则是本次取样时接收液中的药物浓度 [2]。

 表 1 乳膏中利多卡因和罗哌卡因体外透皮吸收结果（n=6）

图 2 乳膏中利多卡因（A) 和罗哌卡因（B）累计透皮吸收量

 由此可见，不同批号的复方利多卡因乳膏 12 小时累计 透皮吸收量并无明显差别，遂对其物理性质（稠度，质地， 稳定性等）进行比较，选出最优处方即批号为 20210312 的 乳膏处方。 

1.5 药效学实验

 1.5.1 小鼠热板试验 

选取昆明种雌性小鼠 80 只，置于温度恒定于 (55.0 ± 0.5)℃的热板上，每只小鼠在给药前测定两次痛阈值，间隔 30 分钟，选取痛阈平均值处于 10 ～ 30 秒之间的 50 只用于 后续实验。将其腹部剃毛（区域约 1.5 cm × 1.5 cm），并 随机分为五组：空白对照组、复方利多卡因乳膏低、中、高 剂量组及阳性对照组。各组受试物均匀涂抹于小鼠腹部脱毛 区及四足掌（每处给药面积约 1 cm2 ）。低剂量组共涂抹 2 次， 首次涂腹部，第二次涂四足掌；中剂量组共 4 次，前两次涂 腹部，后两次涂四足掌；高剂量组共 6 次，前三次涂腹部， 后三次涂四足掌，每次涂抹间隔均为 30 分钟。空白对照组 与阳性对照组涂抹方式与高剂量组相同。各组动物于末次给药后 30、60、90 及 120 分钟分别测定痛阈值，若痛阈超过 60 秒，则按 60 秒记录 [1]。 

实验结果显示，复方罗哌卡因乳膏各剂量组动物的痛 阈值均在给药后 60 分钟达到峰值，与空白对照组相比差异 显著（P < 0.05），并呈现明显的量效依赖关系，结果见表 2。 

表 2 各实验组对小鼠热板试验的影响 ( n=10)

2 讨论 

本研究主要考察了复方罗哌卡因乳膏的处方组成、含 量测定以及处方优化。处方以利多卡因和罗哌卡因为主药， 以聚乙二醇 -7- 硬脂酸酯、十八醇、轻质液状石蜡为乳膏 油相，羟苯乙酯为防腐剂，EDTA-2Na 为金属离子络合剂最 终制备而得。含量测定使用 HPLC 法，方法学检测证明该法 可行性良好，适用于复方利多卡因乳膏的含量测定。本研究 使用了体外透皮吸收法进行处方筛选。药效学实验选用热板 法镇痛实验，在动物实验中复方罗哌卡因乳膏能明显提高小 鼠的痛阈值，作用效果在两小时时达到最强，并呈现良好的 量效依赖关系且作用时间短，应用复方罗哌卡因乳膏 1 h 后 起到了满意的镇痛效果，罗哌卡因和利多卡因都是中效酰胺 类局部麻醉药，已广泛应用于浅表损害及皮肤手术的镇痛 [3]。 以往研究表明，盐酸利多卡因和盐酸罗哌卡因对于表 面麻醉有着极大的作用 [4]，本研究更是为其投入临床使用建 立了可能性。本研究采用了复方乳膏外用剂型，增强了药效， 大大降低了其可能带来的不良反应，这对于使用复方罗哌卡 因乳膏用于整形科表面麻醉提供了重要参考价值。

 参考文献： 

[1] 杜文霞 , 钱金 , 岳明月 , 等 . 复方罗哌卡因乳膏的制 备及药效学研究 [J]. 药学服务与研究 ,2017,17(6):432-436. 

[2] 杨盟 , 杨帝顺 , 顾永卫 , 等 . 基于皮肤、血液双位点 同步微透析技术的雷公藤甲素纳米乳体内药动学研究 [J]. 中 国药学杂志 ,2018,53(11):894-899.

 [3] 常梦琦 , 孙宇琦 , 徐秋瑾 , 等 . 复方利多卡因乳膏在 中国健康受试者体内的生物等效性研究 [J]. 中国临床药理学 杂志 ,2024,40(09):1321-1326. 

[4]Yang X, Wei X, Mu Y, et al. A review of the mechanism of the central analgesic effect of lidocaine [J]. Medicine (Baltimore). 2020,99(17):e19898. 

作者简介：孟剑霞（1992-），女，汉族，籍贯江苏， 主管药师，硕士，主要从事整复外科相关药物临床研究与基 础实验，E-mail：shjymjx@163.com。 通信作者：杨盟（1991-），主管药师，主要从事药物 新型给药系统及抗肿瘤免疫药剂学，药物新制剂、新技术及 皮肤肿瘤免疫机制研究 . 

基金项目：上海市“科技创新行动计划”启明星项目（扬 帆专项）(22YF1423000

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